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USP26基因敲除小鼠模型构建技术原理

2021-10-13 08:22分类:水光医美 阅读:

在西安交通大学基础医学院的一项关于USP26基因突变导致小鼠精子发生弱点有关的雄性生育力矮下的钻研中,行使C57BL/6J小鼠竖立USP26敲除小鼠(Usp26-/Y),别离检测野生型小鼠(Usp26+/Y)与USP26敲除小鼠生育率、血清中激素程度、精子数目,精子活力,睾丸细胞DNA含量、睾丸细胞倍型分析, 慈禧效果表现,USP26敲除小鼠的USP26蛋白在睾丸构造中无外达(图3);相比于Usp26+/Y小鼠,Usp26-/Y小鼠的生育率降矮约18.72%、睾酮(T)程度只有野生型小鼠的49.1%、促黄体生成素(LH)增补到387%;促卵泡激素(FSH)无隐微转折;精子数目缩短、活力无清晰不同;成熟的单倍体生殖细胞(HC)隐微缩短;未成熟单倍体、二倍体和四倍体细胞异国不同。

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图. IHC染色分析USP26蛋白在Usp26+/Y小鼠和 Usp26-/Y小鼠睾丸中的外达和分布[4]

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图. Usp26缺失导致雄性小鼠不育[4]。A) Usp26+/Y和Usp26−/Y小鼠体内的生殖能力。n = 11 and 15; *P < 0.05. B) ELISA测定Usp26+/Y和Usp26−/Y小鼠性激素程度。(每组n = 10). LH, luteinizing hormone(促黄体激素); FSH, follicle-stimulating hormone(促卵泡激素); E2, estradiol(雌二醇); T, testosterone(睾酮). *P < 0.05, **P < 0.001. C-F)精液分析效果。一切值用平均值±SD外示(n = 10)。采用单因素方差分析(one-way ANOVA)和Tukey的众重比较检验确定统计学不同。C)计算机辅助精子分析(CASA)的Usp26+/Y和Usp26−/Y小鼠精子计数。D) 0.5%伊红染色计数活精子。♦: 活精子; ☆:物化精子。E) CASA检测Usp26+/Y和Usp26- /Y小鼠的精子活力和活力。F) CASA计数Usp26+/Y和Usp26-/Y小鼠进走性和非进走性精子百分比。G) Usp26+/Y和Usp26-/Y小鼠睾丸的流式细胞术分析(每栽基因型n = 10): G)睾丸细胞代外性DNA含量分布直方图。流式细胞仪直方图表现Usp26 -/Y和Usp26+/Y小鼠有4个主要峰:HC峰(成熟单倍体细胞或悠久精子细胞)、1C峰(未成熟单倍体细胞或圆形精子细胞)、2C峰(精原细胞和次级精母细胞)和4C峰(初级精母细胞);蓝线:野生型小鼠;红线:纯相符小鼠。H) Usp26-/Y和Usp26+/Y小鼠睾丸亚单倍体(HC)、单倍体(1C)、二倍体(2C)和四倍体(4C)细胞的相对百分比,*P<0.05。

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